基因表达、分型及定量分析检测丨基因功能研究丨技术服务

基因表达、分型及定量分析检测

Western Blot

蛋白免疫印迹（ Western Blot）是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜或PVDF膜上，然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术，现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。

QPCR

实时荧光定量PCR（Quantitative Real-time PCR）是一种在DNA扩增反应中，以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应（PCR）循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。

qPCR是在PCR扩增过程中，通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。由于在PCR扩增的指数时期，模板的Ct值和该模板的起始拷贝数存在线性关系，所以成为定量的依据。

FISH

FISH即染色体荧光原位杂交（Flourescence in situ hybridization，FISH）是通过荧光素标记的DNA探针与样本细胞核内的DNA靶序列杂交，利用了DNA碱基对的互补性，将直接标记了荧光的单链DNA（探针）和与其互补的目标样品的DNA（玻璃片上的标本）杂交，通过观察荧光信号在染色体上的位置反应相应染色体的情况，从而获得细胞核内染色体或基因状态的信息。从而对待测核酸定性、定位或相对定量分析的一种研究方法。

免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白，主要包括蛋白和一抗结合，其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗，荧光显微镜下即可观察到荧光，通过荧光的强度及荧光数目对目的蛋白进行分析。

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