细胞功能分析检测丨药物发现丨技术服务

细胞功能分析检测

血管再生

血管再生是指从已有的毛细血管或毛细血管后静脉发展成新的血管，它是一个复杂的生理过程，这是正常过程和病理过程重要的组成部分。血管再生是肿瘤生长和转移扩散的必要条件之一，因此是肿瘤学的热门研究领域。

细胞凋亡

细胞凋亡（apoptosis）指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡，细胞凋亡检测是目前非常热门的研究方向，它不仅可以用于肿瘤细胞和组织在内的不同种类病理标本研究，还能应用于临床诊疗、新药研制、生物制品开发、以及肿瘤的基因治疗等。

目前比较常用的凋亡检测有：半胱天冬酶活性检测、线粒体功能检测、质膜完整性和不对称检测、用于DNA断裂检测的TUNEL试剂盒等等。

细胞自噬

细胞自噬是细胞在自噬相关基因（autophagy related gene，Atg）的调控下利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程。

细胞自噬的过程：

① 细胞接受自噬诱导信号后，在胞浆的某处形成一个小的类似"脂质体"样的膜结构，然后不断扩张，被称为吞噬泡；

② 吞噬泡不断延伸，将胞浆中的任何成分，全部揽入，然后"收口"，成为密闭的球状的自噬小体；

③ 自噬小体形成后，可与细胞内吞的吞噬泡、吞饮泡和内体融合（非必然发生）；

④ 自噬体与溶酶体融合形成自噬溶酶体（Autolysosome），期间自噬小体的内膜被溶酶体酶降解，二者的内容物合为一体，自噬体中的"货物"也被降解，产物（氨基酸、脂肪酸等）被输送到胞浆中，供细胞重新利用，而残渣或被排出细胞外或滞留在胞浆中。

细胞周期

细胞周期是指细胞从一次分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的时间，它代表着生命从一代向下一代传递的连续过程，分为间期和分裂期两个阶段。

分裂间期：间期又分为三期、即DNA合成前期（G1期）、DNA合成期（S期）与DNA合成后期（G2期）；

分裂期M期：细胞分裂期，指细胞分裂开始到结束。

常用的细胞周期检测方法为PI法，细胞内的DNA被碘化丙染色后，可用流式细胞仪对细胞进行DNA含量检测，然后根据DNA含量的分布情况，进行细胞周期的分析。

细胞代谢

细胞代谢是由涉及生物分子合成（合成代谢）、维持或分解（分解代谢）的各种复杂生物化学反应定义的，代谢活动的测量也可作为细胞活性或细胞增殖检测的一个指标。

离子指示剂和膜电位

现有许多分子探针离子指标，以跟踪具有强烈荧光信号和一系列波长选项的钙和其他离子浓度，包括钙指标，纳指标，镁指标，锌指标和pH指标，常用的是钙指标，Ca²⁺浓度检测广泛用于通过G蛋白耦合受体（GPCR）对激动刺激和拮抗抑制信号进行细胞内测量，G蛋白耦合受体（GPCR）是与药物发现相关的一个大型且活跃的目标类别，荧光系列钙指标在Ca²⁺的静息水平上发出基底荧光，每次随着Ca²⁺的浓度增加。其荧光强度增加高达>100倍，为适应药物筛选，还有相应的试剂盒检测方法通过基于细胞的第二信使分析可实现高通量分析。

膜电位的增减在许多生理过程中起着核心作用，包括神经冲动传播、肌肉收缩和细胞信号，膜电位几乎存在于所有的细胞中，并对细胞的功能起着决定性的作用，由于带电离子的跨膜运动，使膜内外的电荷发生变化，而膜电位的增大或减小都会使细胞的功能状态发生改变。通过细胞内离子浓度和膜电位的变化转化为荧光信号来检测细胞活动，可用于检测使用药物后对细胞的影响，所以在药物研究方面具有重要作用。

氧化应激

氧化应激（oxidative stress）是指机体或细胞内氧自由基的产生与清除失衡，导致活性氧（Reactive Oxygen Species，ROS）和活性氮（Reactive Nitrogen Species，RNS）在体内或细胞内蓄积而引起的氧化损伤过程。

当细胞发生氧化应激时，ROS生成急剧增加，使膜脂质、蛋白质和核酸发生变化。这些生物分子的氧化损伤与衰老以及各种病理事件相关，包括动脉粥样硬化、癌变、缺血再灌注损伤和神经退行性疾病等。

氧化应激的评价方法主要分为三大类：测定由活性氧修饰的化合物；测定活性氧消除系统酶和抗氧化物质的量；测定含有转录因子的氧化应激的物质种类。

现有多种荧光检测工具，可追踪氧化应激的不同参数，例如脂质过氧化、选择性ROS检测、基于荧光蛋白的氧化还原传感器、谷胱甘肽水平等等。这些检测方法需利用高内涵或荧光显微设备来检测信号。

资料下载